第九节 标本的采集与处理

临床生化检验常用的标本包括全血、血清、血浆、尿液、粪便、唾液、脑脊液、滑膜液、羊水等。本节介绍常见标本的采集及对检验结果的影响。

一、血液

血液标本是指为完成某项或多项临床化学检验项目而采集的一定量的血液，包括抗凝血和非抗凝血。临床化学检验血液标本分为血清、血浆和全血。血清和血浆为临床常用，除前者不含纤维蛋白原外，其余多数化学成分差异较小；全血只有在红细胞内成分与血浆成分相似时才用，血气分析、血红蛋白电泳等时用全血，临床化学分析多不用全血。按照采血部位的不同，又可分为静脉血、动脉血和毛细血管血。

（一）采血部位

1.静脉采血

应用最多的采血方式。常用的静脉为肘前静脉、腕背静脉，小儿和新生儿有时用颈静脉和前囟静脉。目前一般真空采血，采用国际通用的头盖和标签颜色显示采血管内添加剂的种类和检测用途。

2.动脉采血

主要用于血气分析。常用的动脉为股动脉、肱动脉、桡动脉和脐动脉。

3.毛细血管采血

适用于仅需微量血液的检验或婴幼儿检验。常用部位为耳垂、指端，小儿有时为大趾和足跟。采血针刺入皮肤深度应为2mm（< 2.5mm），采血局部应无炎症、水肿等。

（二）血液标本的处理与保存

血液标本采样后应尽可能早地自然地使血清（浆）从与血细胞接触的全血中分离出来。一般应于采血后2h内分离出血清或血浆。全血处理为血清或血浆分为离心前、离心和离心后三个阶段，对各不同阶段均有具体要求。

1.离心前阶段

即指标本采集到离心处理前的一段时间。

（1）血清：

标本离心前一般应令其自行凝集，不可用木棍等剥离凝血块。通常于室温（22~25℃）放置30~60min，血标本可自发完全凝集；冷藏标本凝集缓慢；加促凝剂时凝集加快，此时标本采集后应轻轻颠倒混合5~10次，以确保促凝剂作用。

（2）血浆：

需用血浆标本时，必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，而且采血后必须立即轻轻颠倒采血管混合5~10次，以确保抗凝剂发挥作用，5~10min后即可分离出血浆。

（3）冷藏标本：

标本冷藏可抑制细胞代谢，稳定某些温度依赖性成分。但全血标本一般不能冷藏；血钾测定标本冷藏不得超过2h。血液中儿茶酚胺、pH/血气、氨、乳酸、丙酮酸、胃泌素、甲状腺激素等检测时需用制冷的标本。标本需要冷藏（2~8℃）时，标本采取后应立即将标本置于冰屑或冰水混合物，并且必须保证标本与制冷物充分接触。

2.离心阶段

即指标本处于离心机里的一段时间。临床化学检验血液标本离心时，相对离心力为（1 000~1 200）×g，离心时间为5~10min。

离心时产热不利于分析物稳定，临床化学分析血液标本离心时必须采用温度控制离心机。一些温度依赖性分析物（如促肾上腺皮质激素、环腺苷酸、儿茶酚胺等）应在4℃分离；无特殊温度要求的分析物，离心温度应设定在20~22℃，温度低于15℃可以人为地使血钾测定值增高；冷藏运送的标本必须在要求的温度下离心。

标本离心最好一次完成，若需再次离心，应距上次离心相隔时间很短；对于含有分离物质的血标本绝不可以再离心。

3.离心后阶段

指标本离心后和用于检测的血清或血浆被取出一定量之前的一段时间。血清或血浆分离后，应尽快进行检测分析；如果由于种种原因，不能进行测定，应将分离的血清或血浆合适贮存。

一般来说，22~25℃血清或血浆的保存不超过8h；如果8h内不能完成检测，血清或血浆应置于2~8℃保存；48h内不能完成的实验项目，或分离的血清或血浆需贮存48h以上时，应于-20℃或者-80℃保存。标本保存时应特别注意，标本不可反复冻融（只能冻融一次），且不可贮存于无霜冰箱（可造成样品温度变化）；离心后分离凝胶上面的血清可保存2~5d，但必须保证凝胶的完整性；在应用非凝胶分离物质时，离心后必须立即将血清或血浆移出；血清或血浆必须保存于密闭的试管中。

（三）影响因素

1.禁食时间

被采血者在标本收集前应禁食一整夜（即至少12h），其原因是脂肪餐后血清中甘油三酯的水平可持续升高近9h，而总胆固醇和载脂蛋白AⅠ、AⅡ的浓度几乎无影响。但是，过长的禁食时间也会影响实验结果，如48h禁食，肝脏胆红素清除能力比一般情况下高240%，使血清间接胆红素浓度降低。如果延长禁食，一些特异性蛋白质，如补体、前白蛋白和白蛋白水平降低。因此，应统一禁食的时间，一般为12h。

2.标本采集时间

标本采集时间要依据血液循环中分析物水平的变化而定，保持每天标本采集时间恒定对于消除由日内变异造成的影响很重要。如激素的测定需要严格控制标本采集的时间。

3.采血时体位

长期以来，人们忽视了采血时体位变化对生化检测的影响。为了减少由于采血体位的变化产生的影响，建议门诊患者坐15min后再采血。

4.压脉带的影响

使用压脉带可降低血管内压力，使其低于心脏收缩压，使小分子和液体从血管内移出至组织间隙，而不能通过毛细血管的大分子物质的浓度增加。使用压脉带过久，局部缺氧使无氧酵解增加，血浆中乳酸增高而pH值降低，pH值降低使钾从细胞内移出，引起血清钾假性升高。在静脉采血时避免过度的握拳，使用压脉带小于1min。

5.抗凝剂

临床生化常用的抗凝剂为肝素、EDTA、氟化钠、枸橼酸盐等。例如肝素包括肝素钠、肝素锂和肝素铵，三种盐用于电解质的测定可得到相同的结果，但肝素锂优于其他两种。因为肝素钠可能引起钠水平的假性升高，用尿素酶测定尿素时，肝素铵可引起血清尿素浓度的假性升高。

6.溶血

溶血可影响测定结果。溶血严重影响的检验项目有：乳酸脱氢酶、血清门冬氨酸氨基转移酶、血清钾和血红蛋白；中度影响的项目有：血清铁（↑）、血清丙氨酸氨基转移酶（↑）和血清甲状腺素（↓）；轻度受影响项目有：总蛋白、白蛋白、血清磷、血清镁、血清钙和酸性磷酸酶。

7.阳光

应避免对光线敏感的分析物暴露在人造光或太阳光（紫外线）照射下。如维生素A、维生素B₆、β-胡萝卜素、卟啉、胆红素等测定时，标本管应该用铝箔或类似物质包裹避光。

8.标本运送

全血标本应尽快从采血现场运送至实验室，如果运送距离较远，特别是因分析物稳定性有影响，必要时可于采血现场分离出血清或血浆后，再送往实验室；标本运送过程中要注意标本的包装、温度要求、处理方法等，要确保分析成分的稳定性；标本管在运送过程中要保持管口封闭、向上垂直放置。

二、尿液

同血液标本一样，尿液标本受饮食、运动、药物量等因素的影响也较大，特别是饮食的影响，故一般来说晨尿优于随机尿。

（一）标本类型

1.首次晨尿

指清晨起床后的第一次尿标本。首次晨尿较浓缩和酸化，有形成分，如血细胞、上皮细胞、管形等，相对集中便于观察。适合于做各种有形成分检查，尿蛋白、尿糖等测定。

2.随机尿

即随意一次尿。留取方便，但受饮食、运动、药物影响较甚，易于出现假阳性和假阴性结果，如饮食性蛋白尿、饮食性糖尿，维生素C干扰潜血结果等。适合于门诊、急诊的常规检测。

3.24h尿

第一天晨8：00排空膀胱后留取至次日晨8：00的所有尿液。测量并记录24h尿液总量，混匀后进行检测。常用于尿液成分定量测定。如果24h尿液收集不完全或不准确，可以用尿肌酐作为参比基准物，即同时测定尿液中待测物和肌酐浓度，用待测物浓度比肌酐浓度表示结果，如尿钾30mmol/g肌酐。

（二）尿液保存

尿液标本应在采集后2h内送检，最好在30min内完成检验。如不能及时检验，应正确保存，包括冷藏和加防腐剂。

1.冷藏

多保存于2~8℃的冰箱内，时间最好不超过6h。如果需要较长时间保存标本，可置于-20℃或者-80℃冰箱中。

2.防腐剂

临床常用尿液防腐剂见表1-21。

三、粪便

一般情况下，采集自然排便的标本，尽量采集可疑有阳性的部分。一般常规检测，3~5g即可。隐血试验时，应在试验前3d禁食肉类、动物血及某些蔬菜类食物，并禁服铁剂及维生素C等干扰试验的药物。脂肪定量试验应该先定量服食脂肪膳食，每日50~150g，连续6d，从第3天开始收集72h内的粪便，混合称重，取60g送检。

四、脑脊液

脑脊液由临床医师进行腰椎穿刺采集，必要时可从小脑延髓池或侧脑室穿刺获得。穿刺后应由医师用压力测定，正常人脑脊液压力卧位为80~180mmHg，儿童为40~100mmHg。任何病变使脑组织体积或脑脊液量增加时，脑脊液压力均可升高。待压力测定后将脑脊液分别收集于3个无菌试管中，每管收集1~2mL。第一管做细菌培养，第二管做化学分析和免疫学检查，第三管做一般性状及显微镜检查。脑脊液标本必须立即送验及时检查，以免细菌状态破坏、糖分解或出现凝块。

五、羊水

羊水检查多在妊娠16~20周期间进行，通过羊膜穿刺术，采取羊水进行检查。检查项目包括细胞培养、性染色体鉴定、染色体核型分析、羊水甲胎蛋白测定、羊水生化检查等，以确定胎儿成熟程度和健康状况，诊断胎儿是否正常或患有某些遗传病。抽出的羊水应立即送检。若不能立即送检，应放在4℃冰箱内保存，但不得超过24h。羊水经1 000~2 000r/min离心10min后，取其上清液做生化检查。属中期妊娠的羊水细胞，进行染色体核型分析或先天性代谢缺陷病检查；属晚期妊娠的羊水沉渣，进行含脂肪细胞及其他有形成分的检查。

六、精液

在采集精液前必须停止性生活2~7d，并且不得有手淫、梦遗等现象，不得沾染烟酒，不能服对生精功能有影响的药物等。采精时间以晨起为佳，采精前用温水将双手、阴部，尤其是龟头洗净。可采用手淫法或电动按摩射精法引起排精。精液的排出具有一定顺序，开头部分来自前列腺、附睾及壶腹，伴有大量精子，最后部分来自精囊，故应收集整份精液，不要遗漏任何部分，尤其是开头部分。正因为易丢失精液的第一部分，故不能用体外射精法收集精液。盛精液的容器应干净、无菌、干燥，采精前容器的温度应与室温相同；瓶子不应过大，但瓶口不应过小，以免将精液射出瓶外；还应贴上标签，记录姓名及取精时间。在冷天应将精液标本保温，不可倾斜或倒置，尽可能在1h内送到实验室。

七、前列腺液

采集前列腺液前要禁欲3~7d。因为前列腺液是精液的主要组成成分之一，如果患者最近有性行为则可能会使采集失败。另外，排精及情绪兴奋可使前列腺液的白细胞计数增高，从而影响结果。但如禁欲超过7d，前列腺会有白细胞积聚，同样会造成炎症的假象。

采集前列腺液时，患者先排尿。一般弯腰检查即可，臀部要抬高，或取右侧卧位。当医生用手指缓慢从肛门插入并触摸前列腺时，患者要张口呼吸并放松肛门，以配合医生操作。医生用按摩法使前列腺液从尿道口流出或滴出，弃去第1滴，再用玻璃片或玻璃管收集进行检验。

八、浆膜腔液

浆膜腔液包括胸腔、腹腔、心包腔及关节腔等，一般由临床医生用浆膜腔穿刺技术采集获得标本。正常时，浆膜腔液量少，一般送检标本均为病理性积液。

九、痰液

留取痰液的方法有自然咳痰、气管穿刺吸取、支气管镜抽取。后两种操作复杂且有一定创伤，常用自然咳痰法。一般以清晨第1口痰作标本最适宜。

（黄　玥）