案例10 探寻血清甘油三酯失控背后的奥秘

一、案例说明

我院第一门诊部检验科新装一台迈瑞SAL9000生化免疫级联机,由于科室还留有其他厂家的旧试剂,需要先将旧试剂全部用完,再切换为迈瑞配套试剂。根据第三方试剂说明书,在迈瑞仪器上设置相应参数,并做校准质控,结果显示大部分项目结果均正常,唯独TG项目质控结果小于0.2mmol/L,与靶值相差巨大。

二、案例分析

大部分生化项目采用的是复合校准品和质控品,目前仅有TG这一个项目失控,笔者首先认为是TG试剂问题。在查看了TG固定时间法参数设置与试剂说明书后,没有发现问题。接着到校准界面观察校准反应曲线,发现水的吸光度超高,达4734(图2-1)。

图2-1 校准反应曲线

进一步怀疑是零点校准品用水有问题。笔者采用另一品牌纯净水,重新校准,结果显示反应度仍然很高,并不符合预期。笔者重新核查参与到整个反应当中的物质,怀疑是管路中的水造成了污染。由此提出疑问:怎么用实验证明是管路中的水造成了污染?管路中的污染源是什么?

通过TG项目的试剂说明书可知该项目为颜色反应,于是笔者设计了一个简单的实验。首先,取两个样本杯,在两个杯中按比例加入TG检测项目的试剂R1和试剂R2。之后分别加入水机中的水和外购的另一品牌纯净水,混匀,观察二者颜色变化。结果显示加入水机中的水的样本杯颜色逐渐变深,而加入矿泉水的杯子颜色无明显变化(图2-2)。

图2-2 左杯为加水机中的水,右杯为加入的矿泉水

由此可知,水机中的水受到了污染。于是笔者将水机中的水排空,清洗水箱,同时将仪器上去离子水瓶中的水排空,水机重新制水,并对仪器管路包括样本针、搅拌杆清洗及液路进行多次灌注。次日再进行一次校准,水的反应度下降至正常水平,对当天之前做的质控结果进行重新计算,结果为1.3mmol/L,结果在控,校准曲线和反应曲线见图2-3和图2-4。

图2-3 校准曲线

图2-4 反应曲线

进一步探索,为何原水机中的水会被污染,是被什么组分所污染?翻看试剂盒说明书发现甘油会对检测结果造成影响。于是联系了制水机厂家询问可能的原因,制水机厂家答复:水机出厂时,其过滤器滤芯所用的滤膜上面含有起保护作用的甘油组分,在水机启用之前,需要经过足够长时间的冲洗,才可以将其中的甘油组分除尽。由此可知,水机中的水污染源来自滤膜上的甘油成分。

三、评价

(1)质控失控是检验人员日常工作中最常遇到的问题。笔者通过这个案例与检验同行一同体会仪器反应曲线的重要价值。TG测定结果受试剂、仪器和标准物等多种因素的影响。曲线上的一个个数据点能帮助我们及时找出问题的原因,而不是凭借经验采取行动,造成试剂损耗和时间浪费。

(2)在查找失控的原因时,试剂厂家的说明书起到了关键性的作用,推动整个排查进行下去。因此,在此提醒检验室的同道们,对于某个问题一筹莫展时,可以考虑拿出试剂说明书一探究竟。

(3)最后一点是刨根问底的精神。结果失控?什么原因导致的失控?怎么验证?这个原因为什么会导致失控?之后怎么避免?在一步步思考,一步步实验的过程中,能提高检验人员自身的专业水平。

(龚文胜 徐 璇 编,

张秀明 审)