案例11　异常高TG检测假性低值分析

一、案例说明

检验科检测一例样本时，检测结果有吸光度异常的报警。该样本在分检时已标注严重脂血，可TG结果为3.75mmol/L，与标本状态严重不符。查看TG的反应曲线，发现反应的OD值迅速升到顶部后便开始下降，到达反应终点时，OD值仅为峰值的六分之一，检测结果明显假性偏低（图2-5）。

该样本用手工稀释后，测定结果为67.2mmol/L，远超TG的线性20mmol/L，反应曲线正常，立即发送报告给临床。笔者同时使用检测系统B检测，结果虽有所改善，但也存在着同一现象。

二、案例分析

临床生化检测TG时常用终点法，实验反应到后期，所有待测物转变成产物时，吸光度不再上升或下降。终点法的特点一般是当反应物浓度过高时，结果会保持在该实验的线性上限。目前临床检测TG的试剂上限一般在20mmol/L左右，所以该样本的TG初测结果理论上应不低于20mmol/L，这与第一次测得的结果也不符。查看TG的试剂说明书发现，两个厂家都是氧化酶法，显色反应均为Trinder反应，考虑检测样本的TG浓度极高，反应速度快，使参与反应的氧迅速耗尽，而空气中的氧未能及时溶解于反应液中，导致反应停滞甚至可能发生逆反应，进而造成错误的结果，并且以假性低值多见。笔者采用手工检测，可以更直观地呈现这种现象。在小口径的反应杯中，当试剂与样本充分混匀反应一段时间后，反应液会出现分层，上层颜色较深，下层较浅，这是氧未能及时进入反应液下层所导致的。

三、评价

随着现代人们生活方式的调整以及饮食结构的改变，体力劳动不断减少而高热量高脂肪食物的过多摄入，使越来越多的人成了高脂血症患者。在实际临床检验过程中，此类脂浊标本时有发生，我们应该怎样避免这样的假阴性结果呢？除了加强检验人员对异常反应曲线的识别能力外，还可通过反应曲线监测到吸光度异常触发报警，从而关联自动稀释重测功能，得出准确结果。

在临床检验过程中，特殊疾病样本检测超出生化试剂检测线性范围，反应曲线异常的情况越来越多见。如果检验人员未能及时发现异常情况，该“正常”报告有可能就被误发；即便提前发现反应曲线异常，频繁的复查工作也会影响工作效率；而对于才从事检验工作的人员，异常曲线识别能力尚待加强。我们在检测系统A的反应曲线检查参数设置界面时（图2-6），提供了4个可设置条件，可以针对不同项目、不同异常情况，进行灵活多样的过程数据检查和判断设置。其中P1和P2是指反应曲线上测光点顺序编号，软件自动计算P2-P1的值；M和N是指判断阈值的下限和上限，P2-P1的值与设定的判断阈值比较，判断反应过程数据是否存在异常。当该曲线出现异常，仪器通过应用反应曲线检查参数和算法功能，实现自动识别并判断异常曲线，给出“RE”结果标识，通过自动稀释重测后，反应曲线正常，得出正确的测试结果68.43mmol/L（图2-7），与手工稀释后检测的结果一致。

具有测量程序的配套系统，通过系统化的参数设置（如波长、反应时间、样本量等），在临床应用过程中，可对底物耗尽、Trinder反应、前带效应等检测异常进行预判及调整，提高检测效率，缩短TAT时间，同时减少潜在的出错风险，提高临床及患者满意度。脂血是生化检测最常见的干扰，干扰的强弱和项目所用的波长、方法学、样本与试剂的比例、脂血的严重程度密切相关。

值得一提的是，如果标本已经出现了严重的脂血，需要解决的不仅仅是TG一个项目，通过系统的参数设置也只是解决部分项目的干扰，更多的项目是没有办法避免的，这时候需要选择更有效地去除脂血的干扰。消除脂血干扰的方法主要有沉淀法、有机溶剂提取法、高速离心法和盐水稀释法等，这些方法都是根据脂血标本的不同特性设计的，存在各自的优缺点。脂蛋白脂肪酶（lipoprteinlipase，LPL）是参与体内脂质和脂蛋白代谢的关键酶。主要催化血清CM和VLDL中的TG分解，生成脂肪酸和甘油两种代谢产物。崔晓蕾等人利用添加LPL的方法对高脂血标本进行预处理，结果发现，在不影响TG检测的前提下，能排除高脂血对TG、AST、ALT、TP、TBIL、LDH、CK-MB检测的干扰。从使用酶法测定TG的检测原理分析，因为LPL分解TG后生成甘油，并不影响TG指标的后续反应及测定TG的分解产物。因此应用LPL方法处理标本，并不会影响标本中TG指标的测定结果，此点优于其他脂血处理方法。但是血清标本成分十分复杂，LPL处理方法对更多生化指标的影响需要进一步验证。

（蒋晓军　编，

刘振杰　黄宪章　审）